Proteín v norme pyrogallolu v moči

Nádor

Princíp metódy je založený na fotometrickom meraní optickej hustoty roztoku farebného komplexu vytvoreného interakciou proteínových molekúl s molekulami komplexu pyrogallol-červeného farbiva a molybdénanu sodného (komplex Pyrogallol Red-Molybdate) v kyslom médiu. Intenzita farby roztoku je úmerná obsahu proteínu v skúmanom materiáli. Prítomnosť detergentov v činidle poskytuje ekvivalentnú definíciu proteínov rôznej povahy a štruktúry.

Činidiel. 1) 1,5 mmol / l roztoku pyrogallolu červenej (PGK): 60 mg PGK rozpusteného v 100 ml metanolu. Skladujte pri teplote 0–5 ° C; 2) 50 mmol / l roztoku jantárového pufra pH 2,5: 5,9 g kyseliny jantárovej (HOOC-CH.)2CH2COOH); 0,14 g oxalátu sodného (Na2C2O4) a 0,5 g benzoátu sodného (C.)6H5COONa) sa rozpustí v 900 ml destilovanej vody; 3) 10 mmol / l roztoku kryštalickej soli molybdénanu sodného (Na2MoO4 × 2H2O): 240 mg molybdénanu sodného sa rozpustí v 100 ml destilovanej vody; 4) Pracovné činidlo: do 900 ml tlmivého roztoku sukcinátu sa pridá 40 ml roztoku PHC a 4 ml roztoku molybdénanu sodného. PH roztoku sa upraví na 2,5 pomocou 0,1 mol / l roztoku kyseliny chlorovodíkovej (HCl) a jeho objem sa upraví na 1 1. Činidlo v tejto forme je pripravené na použitie a je stabilné, keď sa skladuje na tmavom mieste a pri teplote 2 - 25 ° C počas 6 mesiacov; 5) 0,5 g / l štandardného roztoku albumínu.

Priebeh odhodlania. Do prvej skúmavky sa zavedie 0,05 ml študovaného moču, do druhej testovacej skúmavky sa pridá 0,05 ml štandardného roztoku albumínu a do tretej skúmavky (kontrolná vzorka) sa pridá 0,05 ml destilovanej vody a potom sa do týchto skúmaviek pridajú 3 ml pracovného činidla. Obsah skúmaviek sa zmieša a po 10 minútach sa vzorka a štandard fotometricky odmeria proti kontrolnej vzorke pri vlnovej dĺžke 596 nm v kyvete s dĺžkou optickej dráhy 10 mm.

Výpočet koncentrácie proteínu v analyzovanej vzorke moču sa vykonáva podľa vzorca: t

kde C je koncentrácia proteínu v analyzovanej vzorke moču, g / l;atď. ačlánok- extinkciu študovanej vzorky moču a štandardného roztoku albumínu, g / l; 0,5 - koncentrácia štandardného roztoku albumínu, g / l.

  • farba roztoku (farebný komplex) je stabilná počas jednej hodiny;
  • priamo úmerný vzťah medzi koncentráciou proteínu vo vzorke a absorpciou roztoku závisí od typu fotometra;
  • keď je obsah proteínu v moči vyšší ako 3 g / l, vzorka sa zriedi izotonickým roztokom chloridu sodného (9 g / l) a stanovenie sa opakuje. Pri stanovovaní koncentrácie proteínu sa berie do úvahy stupeň zriedenia.

Liečime pečeň

Liečba, príznaky, lieky

Proteín v norme pyrogallolu v moči

26.02.2009

Kurilyak O.A., Ph.D.

Za normálnych okolností sa proteín vylučuje močom v relatívne malom množstve, zvyčajne nie vyššom ako 100 - 150 mg / deň.

Denná diuréza u zdravého človeka je 1000-1500 ml / deň; koncentrácia proteínu vo fyziologických podmienkach je teda 8 - 10 mg / dl (0,08 - 0,1 g / l).

Proteíny celkového moču predstavujú tri hlavné frakcie - albumín, mukoproteíny a globulíny.

Albumín moču je časť sérového albumínu, ktorý bol filtrovaný v glomeruloch a nebol reabsorbovaný v renálnych tubuloch; Normálna exkrécia albumínu v moči je nižšia ako 30 mg / deň. Ďalším hlavným zdrojom proteínu v moči sú renálne tubuly, najmä distálna časť tubulov. Tieto tubuly vylučujú dve tretiny celkového množstva močového proteínu; Z tohto množstva predstavuje približne 50% glykoproteín Tamm-Horsfall, ktorý je vylučovaný epitelom distálnych tubulov a hrá dôležitú úlohu pri tvorbe močových kameňov. Iné proteíny sú prítomné v moči v malých množstvách a pochádzajú z plazmatických proteínov s nízkou molekulovou hmotnosťou filtrovaných cez renálny filter, ktoré nie sú reabsorbované v renálnych tubuloch, mikroglobulínoch z epitelu renálnych tubulov (RTE), ako aj prostatickom a vaginálnom výtoku.

Proteinúria, to znamená zvýšenie obsahu bielkovín v moči je jedným z najvýznamnejších príznakov, ktorý odráža poškodenie obličiek. Avšak rad ďalších stavov môže byť tiež sprevádzaný proteinúriou. Preto existujú dve hlavné skupiny proteinúrie: renálna (pravdivá) a extrarenálna (nepravá) proteinúria.

Pri renálnej proteinúrii proteín vstupuje do moču priamo z krvi v dôsledku zvýšenia permeability glomerulárneho filtra. Renálna proteinúria sa často vyskytuje v glomerulonefritíde, nefróze, pyelonefritíde, nefroskleróze, amyloidóze obličiek, rôznych formách nefropatie, napríklad nefropatii tehotných žien, horúčkových stavoch, hypertenzii atď. Proteinúria sa môže vyskytnúť aj u zdravých ľudí po ťažkej fyzickej námahe, hypotermii a psychickom strese. U novorodencov sa v prvých týždňoch života pozoruje fyziologická proteinúria, a keď sa vyskytne asténia u detí a dospievajúcich, ortostatická proteinúria (vo vzpriamenej polohe tela) je možná v kombinácii s rýchlym rastom vo veku 7 až 18 rokov.

V prípade falošnej (extrarenálnej) proteinúrie je zdrojom bielkovín v moči prímes leukocytov, erytrocytov, epiteliálnych buniek urotelia močového traktu. Rozpad týchto prvkov, obzvlášť výrazný alkalickým močom, vedie k prenikaniu proteínu do moču, ktorý už prešiel cez renálny filter. Obzvlášť vysoký stupeň falošnej proteinúrie poskytuje krv v moči, s bohatou hematuriou, môže dosiahnuť 30 g / l a viac. Choroby, ktoré môžu byť sprevádzané extrarenálnou proteinúriou - urolitiázou, tuberkulózou obličiek, nádormi obličiek alebo močových ciest, cystitídou, pyelitídou, prostatitídou, uretritídou, vulvovaginitídou.

Klinická klasifikácia zahŕňa ľahkú proteinúriu (menej ako 0,5 g / deň), strednú (od 0,5 do 4 g / deň) alebo závažnú (viac ako 4 g / deň).

Väčšina pacientov s ochorením obličiek, ako je akútna glomerulonefritída alebo pyelonefritída, odhaľuje miernu proteinúriu, ale pacienti s nefrotickým syndrómom zvyčajne vylučujú viac ako 4 g proteínu v moči denne.

Na kvantitatívne stanovenie proteínov sa používa široká škála metód, najmä jednotná Brandberg-Roberts-Stolnikovova metóda, biuretová metóda, metóda kyseliny sulfosalicylovej, metódy využívajúce farbivo Coomassie blue, pyrogallol red dye, atď.

Použitie rôznych metód na stanovenie proteínu v moči viedlo k vážnemu zmätku pri interpretácii limitov normy obsahu bielkovín v moči. Pretože v laboratóriách sa najčastejšie používajú 2 metódy - s kyselinou sulfosalicylovou a pyrogallolovým červeným farbivom, uvažujeme o probléme správnosti hraníc noriem pre ne. Z hľadiska sulfosalicylovej metódy v normálnom moči by obsah proteínov nemal prekročiť 0,03 g / l, az hľadiska pyrogallolu 0,1 g / l! Rozdiely sú trojnásobné.

Nízke hodnoty normálnej koncentrácie proteínov v moči pri použití sulfosalicylovej v dôsledku nasledujúcich bodov:

  • kalibračná krivka je založená na vodnom roztoku albumínu. Moč vo svojom zložení je veľmi odlišný od vody: pH, soľ, zlúčeniny s nízkou molekulovou hmotnosťou (kreatinín, močovina atď.). Ako výsledok, podľa Altshuler, Rakov a Tkachev, chyba pri stanovení bielkovín moču môže byť 3 krát alebo viac! tj Správne výsledky stanovenia možno dosiahnuť len v tých prípadoch, keď má moč veľmi nízku špecifickú hmotnosť a jeho zloženie a pH sa blíži vode;
  • vyššia citlivosť sulfosalicylovej metódy na albumín v porovnaní s inými proteínmi (v tom čase, ako bolo uvedené vyššie, albumín v normálnych vzorkách moču tvorí najviac 30% celkového močového proteínu);
  • ak sa pH moču posunie na alkalickú stranu, kyselina sulfosalicylová sa neutralizuje, čo tiež spôsobí zníženie výsledkov stanovenia proteínu;
  • rýchlosť sedimentácie precipitátov podlieha výrazným zmenám - pri nízkych koncentráciách proteínov sa zrážanie spomaľuje a skoré ukončenie reakcie vedie k podhodnoteniu výsledku;
  • rýchlosť zrážacej reakcie v podstate závisí od miešania reakčnej zmesi. Pri vysokých koncentráciách proteínu môže silné pretrepávanie skúmavky viesť k tvorbe veľkých vločiek a ich rýchlemu zrážaniu.

Všetky vyššie uvedené znaky spôsobu vedú k významnému podceneniu koncentrácie proteínu stanovenej v moči. Stupeň podhodnotenia závisí silne od zloženia konkrétnej vzorky moču. Pretože spôsob sulfosalicylovej kyseliny poskytuje podhodnotenú hodnotu koncentrácie proteínov, normálny limit pre túto metódu je tiež 0,03 g / l, tiež približne trikrát nižší v porovnaní s údajmi uvedenými v zahraničných referenčných knihách o klinickej laboratórnej diagnostike.

Prevažná väčšina laboratórií v západných krajinách upustila od používania sulfosalicylovej metódy na stanovenie koncentrácie proteínu v moči a na tento účel aktívne používa pyrogallolovú metódu. Metóda pyrogallolu na stanovenie koncentrácie proteínu v moči a iných biologických tekutinách je založená na fotometrickom princípe merania optickej hustoty farebného komplexu vytvoreného interakciou proteínových molekúl s pyrogallolovým červeným farbivom a komplexnými molekulami molybdénanu sodného (komplex Pyrogallol Red - Molybdate).

Prečo pyrogallolová metóda umožňuje získať presnejšie výsledky merania koncentrácie proteínu v moči? Po prvé, v dôsledku väčšej mnohonásobnosti riedenia vzoriek moču v reakčnej zmesi. Ak je v metóde sulfosalicylovej pomer vzorky moču / činidla 1/3, potom v pyrogallolovej metóde môže byť v rozsahu od 1 / 12,5 do 1/60 v závislosti od variantu techniky, čo významne znižuje účinok zloženia moču na výsledok merania. Po druhé, reakcia prebieha v sukcinátovom pufri, to znamená pri stabilnom pH. A nakoniec, samotný princíp metódy možno povedať, že je viac „transparentný“. Molybdénan sodný a pyrogallolové červené farbivo tvoria komplex s molekulou proteínu. To vedie k tomu, že molekuly farbiva vo voľnom stave, ktoré neabsorbujú svetlo pri vlnovej dĺžke 600 nm v kombinácii s proteínom absorbujúcim svetlo. Zdá sa teda, že označujeme každú proteínovú molekulu farbivom a výsledkom je, že zmena optickej hustoty reakčnej zmesi pri vlnovej dĺžke 600 nm jasne koreluje s koncentráciou proteínu v moči. Okrem toho, pretože afinita pyrogallolu k rôznym proteínovým frakciám je takmer rovnaká, metóda umožňuje stanovenie celkového močového proteínu. Preto je limit normálnych hodnôt koncentrácie bielkovín v moči 0,1 g / l (je to uvedené vo všetkých moderných západných smerniciach pre klinickú a laboratórnu diagnostiku, vrátane „Klinickej príručky pre laboratórne testy“, upravenej N. Titsou), Porovnávacie charakteristiky pyrogallolových a sulfosalicylových metód na stanovenie proteínov v moči sú uvedené v tabuľke 1.

Na záver by som sa chcel ešte raz zamerať na skutočnosť, že keď laboratórium vychádza zo sulfosalicylovej metódy na stanovenie proteínov moču na pyrogallolovú metódu, limit normálnych hodnôt sa výrazne zvyšuje (z 0,03 g / l na 0,1 g / l!). Tento laboratórny personál by mal určite informovať lekárov, pretože V tejto situácii môže byť diagnóza proteinúrie uskutočnená len v prípade, keď obsah proteínu v moči presahuje 0,1 g / l.

Proteín v norme pyrogallolu v moči

hyperchloremická acidóza, acidóza renálnej tuberkulózy, chronické infekcie močových ciest - bakteriálny rozklad dusíkatých látok v moči na amoniak

Relatívna hustota moču (OPM) alebo merná hmotnosť

Namiesto moderného výrazu PKO sa často používa zastaraný názov „špecifická váha“, ktorý nepresne definuje podstatu tejto metódy. Podľa OPM sa posudzuje podľa jeho osmotickej koncentrácie a schopnosti koncentrácie obličiek a tento ukazovateľ je určený množstvom rozpustených látok v moči.

U zdravého dospelého sa OPM pohybuje v rozsahu od 1 004 do 1 028, najčastejšie od 1 015 do 1 020. Hodnoty OPM sú priamo úmerné zmene intenzity jeho farby a nepriamo úmerné zmene množstva denného moču.

Určenie relatívnej hustoty sa používa pre:


  1. hodnotenie funkcie obličiek, t

  2. monitorovanie dodržiavania prevencie urolitiázy, t

  3. vylúčenie alebo potvrdenie údajnej lýzy buniek moču a bunkových elementov.

Jednotná definícia PKO nemá rozhodujúcu diagnostickú hodnotu. Dôvody zmeny PKO sú uvedené v tabuľke 6.

Dôvody pre zmenu PKO

veľká strata tekutín pri vracaní a hnačke,

pokles diurézy u CLS,

ochorenie obličiek bez narušenia ich schopnosti koncentrácie, t

s resorpciou veľkých efúzií,

s dlhodobou diétou nalačno a bez bielkovín, t

zlyhanie obličiek (chronická glomerulonefritída a pyelonefritída, nefroskleróza, obličky scvrknuté amyloidom),

Hodnota OPM tiež závisí od obsahu proteínu a glukózy v moči. Prítomnosť 5,5 mmol / l glukózy zvyšuje relatívnu hustotu moču o 0,004 a 3 g / l proteínu o 0,001, čo sa musí brať do úvahy pri interpretácii výsledkov štúdie.

Stanovenie močového proteínu

Zavedenie analyzátorov moču do laboratórií a používanie testovacích prúžkov značne zjednodušuje interpretáciu výsledkov, ale tiež navrhuje použitie „nových“ štandardov.

Semikvantitatívna metóda s použitím testovacích prúžkov

Reakcia je založená na metóde brómfenolovej modrej a stanovené koncentrácie proteínov zodpovedajú pyrogallolovej metóde. Sú semikvantitatívne a slúžia na rýchle stanovenie obsahu bielkovín v moči. Obsah albumínu v koncentrácii 0,1 až 0,3 g / l poskytuje výraznú zmenu farby. Indikátor má špeciálnu citlivosť na albumín.

Falošne pozitívne výsledky sa zistia, keď: transfúzia krvi sa transfúzia, jedlá sú kontaminované zvyškami dezinfekčných prostriedkov (chlórhexidín) po liečbe fenazopyridínom.
Stanovenie denného vylučovania bielkovín močom

Moč na výskum sa zhromažďuje počas dňa (napríklad od 6:00 hod. Do 6:00 hod. Ráno). Namerané množstvo moču, pridelené na deň. Vypočítajte denné vylučovanie bielkovín v moči a vynásobte obsah proteínu vg / l dennou diurézou vyjadrenou v litroch.

Klinický význam a normy

Proteín v moči indikuje patologické procesy v močových a močových orgánoch, ako aj dôležitosť tohto ukazovateľa pri metabolickej nefropatii u detí a pri nefropatii u tehotných žien.

V prevažnej väčšine prípadov je spektrum bielkovín v moči, normálne aj patologické, reprezentované albumínom a mikroglobulínom b-2 a je charakterizované pomerom A / G 0,6-3,0 a nefrotickým typom uroproteinogramu, keď je prezentované proteínové spektrum moču. takmer samotný albumín, je zriedkavý.

V minulosti boli diagnostické a diagnostické laboratóriá na stanovenie obsahu bielkovín v moči použité zjednotené Brandberg-Roberts-Stolnikovove metódy, ktoré umožnili v polovici 19. storočia stanoviť vypočítaný horný limit bielkovín v moči na 0,033 g / l. Táto metóda nie je kvantitatívnou analýzou, pretože obsah proteínu (samotný albumín) v skúmanej vzorke je vždy násobkom 0,033 a závisí od počtu jeho riedení. Rovnaké štandardy sú akceptované pre metódu s použitím 3% kyseliny sulfosalicylovej (metóda CCK).

Na stanovenie presnej koncentrácie proteínu v moči sa v súčasnosti používa metóda pyrogallol red (metóda PGA), ktorá významne mení naše chápanie pojmu „norma“. Všetky nasledujúce údaje z literatúry sú založené na ukazovateľoch získaných metódou PGA. Sú všeobecne prijímané a používané na celom svete.

Normálny proteín sa vylučuje močom v relatívne malom množstve:

maximálne 0,1 - 0,15 g / deň alebo až 0,1 g / l (metóda PGA),

maximálne 0,033 - 0,05 g / deň alebo až 0,033 g / l (metóda CCK).

Strata bielkovín v moči z hľadiska metódy CCK je viac ako 0,033 g / l (0,05 g / deň) a metóda PGK je 0,1 g / l (0,15 g denne), vzhľadom na to, že denná diuréza priemerne 1500 ml / deň u dospelých, sa odhadujú ako proteinúria a indikujú ochorenie obličiek.

Mikroproteinúria sa považuje za škálu koncentrácií celkového proteínu v moči, ktorá sa rovná 0,14 g / deň, a výskyt pevne stanovených koncentrácií proteínov v moči detí nad 0,07-0,1 g / deň by sa mal hodnotiť ako patologický a možno ho pripísať „mikroproteinúrii“. ". Je potrebné poznamenať, že mikroproteinúria je skôr úzka zóna diagnosticky významných hodnôt, ktorá zjavne neprekračuje hodnoty normy tzv. "Šedá zóna". Zistenie hodnôt určených koncentrácií proteínov v „šedej zóne“ neumožňuje vyriešiť problém normy a patológie s dostatočným stupňom spoľahlivosti, vyžaduje si však ďalšie vyšetrenie (stanovenie straty denného množstva proteínu). Spoľahlivá a včasná detekcia mikroproteinúrie má významný klinický význam pre predikciu vývoja lézií orgánov močového systému.

Vzhľadom na to, že ranná časť moču, ktorá obsahuje nie menej ako 60% celkovej dennej bielkovinovej hmoty, je častejšie vyšetrovaná, mikroproteinúria, ktorá sa pozoruje nielen pri primárnom poškodení obličiek, ale aj pri včasnom príznaku sekundárneho poškodenia nefrónov, vyžaduje stanovenie koncentrácií proteínov v denných dávkach. porcie moču.

Pri mikroproteinúrii je použitie bežných testovacích prúžkov neúčinné. Na detekciu mikroalbuminúrie sa používajú špeciálne diagnostické prúžky.

Pri určovaní koncentrácie proteínu v moči sulfosalicylovou metódou, kyslé alebo zásadité pH moču, prijímanie jódových prípravkov alebo použitie rádioaktívnych látok obsahujúcich jód, mení priebeh reakcie so SSK. Nadhodnotené výsledky môžu byť pri užívaní sulfa liekov, veľkých dávkach penicilínu a vysokej koncentrácii v moči solí kyseliny močovej. Pretože rýchlosť sedimentácie precipitátov podlieha značným zmenám, pri nízkych koncentráciách proteínov je výsledok podhodnotený a koncentrácie „vysokých“ hodnôt sú ešte vyššie.

Pri analýze metódy PHC nie je účinok matrice moču označený. Použitie metódy PHC umožňuje nielen identifikovať pacientov s mikroproteinúria, proteinúriu, ale poskytuje aj možnosť vykonávať výskum dynamiky počas liečebného a rehabilitačného obdobia.

Stanovenie glukózy v moči

Normálne koncentrácia glukózy v rannom moči zvyčajne nepresahuje 1,8 mmol / l. Tento test je povinný v štruktúre OAM. Registrované výsledky v semikvantitatívnom meraní s testovacími prúžkami sa môžu vyjadriť ako: „nezistené“, čo nevyžaduje stanovenie presného množstva glukózy v moči, alebo „zistené“, čo vyžaduje kvantitatívne hodnotenie - výsledok je vyjadrený v mmol / l. Staré jednotky merania v mg% poukazujú na použitie metód v laboratóriu, ktoré nepodliehajú kontrole kvality, čo znamená, že nemôžu byť použité v práci CFL.

Neexistuje tiež žiadny priamy vzťah medzi koncentráciou glukózy v krvi a moči, keď sú stanovené paralelne, takže koncentrácia glukózy v moči závisí od času a rýchlosti tvorby ranného moču, stavu obličiek pacienta a povahy patologického procesu.

Stanovenie glukózy v dennej dávke moču je neúčinné, pretože glukóza sa pomerne rýchlo podrobuje aktívnej redukcii a nie je možné stanoviť jej presnú koncentráciu.

Na vyhodnotenie závažnosti glykozúrie je potrebné vypočítať stratu glukózy v moči za deň pri jej určovaní v každej časti vybraného moču.

Falošne pozitívne stanovenie glukózy v moči môže byť spojené s tehotenstvom, dojčením, medikáciou (kyselina askorbová, streptomycín, kyselina homogentisová atď.), Stresom, prejedaním.

Výskyt glukózy v moči závisí od jej koncentrácie v krvi, od filtračných procesov v glomeruloch (glomerulárny klírens) a od reabsorpcie glukózy v tubuloch nefrónu. "Prahová hodnota vylučovania obličiek" glukózy u dospelých je 8,8 - 9,9 mmol / l. u malých detí je oveľa vyššia - 10,5-13 mmol / l. Treba mať na pamäti, že tieto údaje sú relatívne a závisia od mnohých dôvodov vrátane a stravovacie návyky. V prípade poruchy renálneho prietoku krvi a / alebo renálnej filtrácie nemusí byť vysoká hyperglykémia sprevádzaná glukozúria.

Glykozúrie sa delia na:


  • pankreatogénne (diabetická glykozúria);

  • extrapancreatic (glukozúria s hyperglykémiou) - s patológiou CNS, hypertyreózou, Itsenko-Cushingovým syndrómom, patológiou pečene a obličiek;

  • glukozúria bez hyperglykémie - s renálnou tubulárnou dysfunkciou.

Stanovenie ketónových telies v moči.

Za normálnych okolností nedetegujte. Ketónové telieska zahŕňajú acetón, acetoacetickú a -oxymaslovú kyselinu. Na ich identifikáciu je potrebné skúmať čerstvo izolovaný moč, pretože pri státí sa kyselina acetoctová rozdelí na acetón, ktorý rýchlo zmizne.

Bežne moč produkuje 20 - 50 mg ketónových telies denne. Ketónové telieska sa objavujú v moči skôr, ako dôjde k významnému zvýšeniu ich koncentrácie v krvi.

1. Definícia používajúca testovacie systémy.

Reakcia je špecifická pre acetón a kyselinu acetoctovú, test kyseliny a-hydroxymaslovej neuvádza. Pozitívny výsledok sa prejavuje zmenou farby s rôznou intenzitou od béžovej po fialovú. Výsledok sa zaznamenáva od + do ++++ bez zadania číselných hodnôt.

Falošne pozitívne výsledky môžu byť spôsobené použitím kapoténu, menštruácie a iných látok, ktorých štruktúra zahŕňa sulfhydrylové skupiny. Fenylketóny a ftalíny dávajú oranžovo-červenú a červenú farbu.

Stanovenie ketónových teliesok v moči má veľký význam pre včasnú detekciu metabolickej dekompenzácie u ľudí s diabetom, najmä u pacientov s nerozpoznaným juvenilným diabetom závislým od inzulínu (deti).

Ketonúria sa vyskytuje:


  • Keď množstvo vstrekovaného tuku nezodpovedá množstvu stráviteľných sacharidov.

  • Pri redukcii zavádzania sacharidov (liečba bez inzulínu) zvyčajným množstvom tuku.

  • S dlhým pôstom.

  • Keď je nezvratné vracanie tehotné.

  • Gestóza prvého trimestra gravidity

  • Acetonemické zvracanie u malých detí.

  • Pri vysokej teplote.

Stanovenie žlčových pigmentov.

Bilirubín a urobilinidy a žlčové kyseliny sa označujú ako žlčové pigmenty.

Stanovenie bilirubínu. Definícia pomocou testovacích systémov.

Za normálnych okolností nedetegujte. V prítomnosti bilirubínu dochádza k zmene farby s rôznou intenzitou od bielej po ružovo-červenú. Praktický limit citlivosti na moč, ktorý neobsahuje kyselinu askorbovú, 9 µmol / l.

Falošne negatívne výsledky sú zaznamenané v prítomnosti veľkého množstva kyseliny askorbovej, s predĺženým vystavením svetlu (oxidácia bilirubínu).

Falošne pozitívne výsledky môžu byť spojené s užívaním liekov, ktoré dávajú červenú farbu moču.

Moč zdravých ľudí obsahuje minimálne množstvo bilirubínu, ktoré nie je možné zistiť vysoko kvalitnými vzorkami. Iba konjugovaný (priamy) bilirubín glukuronid, ktorého koncentrácia je normálna v krvi, je nevýznamný, vylučuje sa močom. Pozitívna reakcia pri stanovení bilirubínu v moči sa vyskytuje v prípadoch, keď hladina konjugovaného bilirubínu v krvnom sére presahuje 30-34 µmol / l, čo naznačuje porušenie toku žlče do dvanástnika.

Bilirubinúria nastáva, keď:


  • Parenchymálna žltačka - akútna a chronická hepatitída sprevádzaná intrahepatickou cholestázou

  • Obštrukčná žltačka:

  • Hemolytická žltačka - bilirubinúria nie je typická, pretože nepriamy bilirubín neprechádza cez renálny filter.

Definícia urobilínových telies (urobilinoidy).

Definícia pomocou testovacích systémov.

Tento test umožňuje detegovať aj fyziologické hladiny urobilinogénu (až do 17 μmol / l) v moči prostredníctvom slabého ružového zafarbenia, ale neumožňuje stanoviť úplnú neprítomnosť urobilinogénu (s úplnou obštrukciou žlčového kanála).

Falošne negatívne výsledky sa pozorujú, keď moč zostáva vo svetle dlhší čas, pri vysokých koncentráciách formaldehydu v moči (otrava alebo jeho použitie ako konzervačného činidla).

Falošne pozitívne reakcie môžu byť spôsobené prípravkami červeného moča, ako je fenazopyridín.

Okamžité zafarbenie poľa v žltej farbe sa objavuje pri vysokých koncentráciách bilirubínu, ale neovplyvňuje výsledky analýzy.

V moči zdravého človeka sú obsiahnuté stopy urobilinogénu a viac ako 6 mg sa vylučuje denne, u detí najviac 2 mg. Čerstvo uvoľnený moč obsahuje urobilinogén, ktorý pri státí moču oxiduje na urobilín. Všetky tieto látky sú deriváty bilirubínu a nazývajú sa urobilinoidy.

Urobilinoidy sú určené:


  • Poškodenie parenchýmu pečene (hepatitída, cirhóza).

  • Hemolytické podmienky

  • Črevné ochorenia (enteritída, tendencia k zápche, obštrukcia čriev).

Zvýšené koncentrácie urobilinoidov sa nachádzajú po jedle bohatom na sacharidy.

Tabuľka 7 sumarizuje diagnostické príznaky spojené so stanovením žlčových pigmentov.

Obsah žlčových pigmentov v moči

Lekár Hepatitída

pečene

Norm proteín v pyrogallole v moči

Zdravý človek produkuje 1,0 - 1,5 litra moču denne. Obsah 8 - 10 mg / dl proteínu v ňom je fyziologický jav. Denný príjem bielkovín v moči 100-150 mg by nemal spôsobiť podozrenie. Globulín, mukoproteín a albumín sú to, čo tvorí celkový proteín v moči. Veľký odtok albumínu naznačuje porušenie filtračného procesu v obličkách a nazýva sa proteinúria alebo albuminúria.

Každá látka v moči má "zdravú" rýchlosť a ak index proteínov kolíše, môže to znamenať patológiu obličiek.

Analýza moču zahŕňa použitie prvej (rannej) dávky alebo dennú vzorku. Ten je výhodnejší na stanovenie hladiny proteinúrie, pretože obsah proteínov má výrazné denné výkyvy. Moč počas dňa sa zhromažďuje v jednej nádobe, meria sa celkový objem. Pre laboratórium, ktoré vykonáva analýzu proteínov v moči, postačuje štandardná vzorka (od 50 do 100 ml) z tejto nádoby, zvyšné množstvo sa nevyžaduje. Pre viac informácií sa vykonáva ďalší test na Zimnitsky, ktorý ukazuje, či sú ukazovatele moču za deň normálne.

Späť na obsah

Proteín v moči je u dospelých normálny a nesmie prekročiť 0,033 g / l. Zároveň denná rýchlosť nie je vyššia ako 0,05 g / l. U tehotných žien je množstvo bielkovín v dennom moči viac - 0,3 g / l. A ráno je moč rovnaký - 0,033 g / l. Štandardy proteínov sa líšia vo všeobecnej analýze moču a detí: 0,036 g / l pre rannú porciu a 0,06 g / l denne. Laboratóriá najčastejšie vykonávajú analýzu pomocou dvoch metód, ktoré ukazujú, koľko proteínovej frakcie sa nachádza v moči. Vyššie uvedené normálne hodnoty sú platné pre analýzu vykonanú s kyselinou sulfosalicylovou. Ak sa použije pyrogallolové červené farbivo, hodnoty budú trikrát odlišné.

Späť na obsah

Príčinou proteínu v moči môžu byť patologické procesy v obličkách:

  • filtrácia v glomeruloch obličiek je nesprávna;
  • absorpcia v proteínových tubuloch je narušená;
  • Niektoré choroby majú silnú záťaž na obličky - keď je proteín v krvi zvýšený, obličky jednoducho nemajú čas ho filtrovať.

Zostávajúce dôvody sú považované za non-obličkové. Takto sa vyvíja funkčná albuminúria. Proteín v analýze moču sa objavuje pri alergických reakciách, epilepsii, zlyhaní srdca, leukémii, otrave, myelóme, chemoterapii, systémových ochoreniach. Viac často ako ne bude takýto ukazovateľ v analýzach pacientov prvým zvončekom hypertenznej choroby.

Zvýšenie bielkovín v moči môže byť spôsobené faktormi nepatologického charakteru, preto budú potrebné ďalšie analýzy.

Kvantitatívne metódy na stanovenie bielkovín v moči dávajú chyby, preto sa odporúča vykonať niekoľko analýz a potom použiť vzorec na výpočet správnej hodnoty. Obsah proteínu v moči sa meria vg / l alebo mg / l. Tieto proteínové indikátory umožňujú stanoviť úroveň proteinúrie, navrhnúť príčinu, odhadnúť prognózu a určiť stratégiu.

Späť na obsah

Pre plné fungovanie tela vyžaduje neustálu výmenu medzi krvou a tkanivami. Je možné len vtedy, ak je v krvných cievach určitý osmotický tlak. Proteíny krvnej plazmy udržujú takú úroveň tlaku, keď nízkomolekulárne látky ľahko prechádzajú z média s vysokou koncentráciou do média s nižšou koncentráciou. Strata proteínových molekúl vedie k uvoľneniu krvi z jej lôžka do tkaniva, ktoré je plné silného edému. Toto je prejav strednej a závažnej proteinúrie.

Počiatočné štádiá albuminúrie sú asymptomatické. Pacient venuje pozornosť len prejavom základného ochorenia, ktoré je príčinou bielkovín v moči.

Stopová proteinúria sa nazýva zvýšenie hladiny bielkovín v moči v dôsledku použitia určitých produktov.

Moč na analýzu sa zachytáva v čistej, odstredenej nádobe. Pred zberom toalety je zobrazené perineum, je potrebné umyť mydlom a vodou. Ženám sa odporúča uzavrieť vagínu kúskom bavlny alebo tampónu, aby výtok z pošvy neovplyvnil výsledok. V predvečer je lepšie nepiť alkohol, minerálnu vodu, kávu, korenistú, slanú a jedlo, ktoré dáva moču farbu (čučoriedky, repa). Silná fyzická námaha, dlhá chôdza, stres, horúčka a potenie, nadmerná konzumácia bielkovinových potravín alebo liekov pred podaním moču provokujú výskyt bielkovín v analýze moču úplne zdravého človeka. Tento prípustný jav sa nazýva stopová proteinúria.

Späť na obsah

Ochorenie obličiek vedúce k strate proteínov:

  • Amyloidóza. Normálne bunky v obličkách sú nahradené amyloidmi (komplex proteín-sacharid), ktorý zabraňuje normálnemu fungovaniu organizmu. V proteinurickom štádiu sa amyloidy ukladajú v renálnych tkanivách, ničia nefrón a v dôsledku toho renálny filter. Proteín sa tak dostane z krvi do moču. Táto fáza môže trvať viac ako 10 rokov.
  • Diabetická nefropatia. Kvôli nesprávnemu metabolizmu sacharidov a lipidov sú zničené cievy, glomeruly a tubuly v obličkách. Proteín v moči je prvým príznakom predvídateľnej komplikácie diabetu.
  • Choroby zápalovej genézy - nefritída. Najčastejšie postihnutie postihuje krvné cievy, glomeruly a prsné-panvové systémy, čím narúša normálny priebeh filtračného systému.
  • Glomerulonefritída je vo väčšine prípadov autoimunitného charakteru. Pacient sa sťažuje na zníženie množstva moču, bolesti dolnej časti chrbta a zvýšenie tlaku. Na liečbu glomerulonefritídy odporúčame diétu, režim a farmakoterapiu.
  • Pyelonefritída. V akútnom období sa vyskytujú príznaky bakteriálnej infekcie: zimnica, nevoľnosť, bolesť hlavy. Toto je infekčné ochorenie.
  • Polycystická choroba obličiek.

V zdravom tele nie sú molekuly proteínov (a ich veľkosť je dosť veľká) schopné prejsť cez filtračný systém obličiek. Preto by bielkoviny v moči nemali byť. Tento ukazovateľ je rovnaký pre mužov aj ženy. Ak analýza indikuje proteinúriu, je dôležité poradiť sa s lekárom, aby ste zistili príčiny. Odborník odhadne, aká vysoká je hladina bielkovín, či existuje sprievodná patológia, ako obnoviť normálne fungovanie tela. Podľa štatistík má žena vyššie riziko urogenitálnej choroby ako človek.

Princíp metódy založené na koagulácii proteínu v moči v prítomnosti dusičnanu (alebo 20% roztoku kyseliny sulfosalicylovej).

Postup prác: do 5 kvapiek moču pridajte 1-2 kvapky kyseliny dusičnej (alebo sulfosalicylovej). V prítomnosti proteínu v moči sa objavuje zakalenie.

Tabuľka. Detekcia patologických zložiek moču.

Poznámka: v prítomnosti glukózy a proteínu v skúmanom moči sa stanoví ich kvantitatívny obsah.

Princíp metódyKeď proteín interaguje s pyrogallolom a molybdénanom sodným, vytvára sa farebný komplex s intenzitou farby, ktorá je úmerná koncentrácii proteínu vo vzorke.

činidlá: Pracovný reagent - roztok červeného pyrogalolu v sukcinátovom pufri, kalibračný roztok proteínu s koncentráciou 0,50 g / l

Vzorky sa miešajú, počkajte 10 minút. pri teplote miestnosti (18-25 ° C). Zmerajte optickú hustotu experimentálnej (Dop) a kalibračnej vzorky (Dk) proti kontrolnej vzorke pri A = 598 (578-610) nm. Farbenie je stabilné 1 hodinu.

výpočet: koncentrácia proteínu v moči (C) g / l sa vypočíta podľa vzorca: t

kde: Dop = Dk = C = g / l.

Normálne hodnoty: až 0,094 g / l, (0,141 g / deň)

Princíp metódyKeď sa D-glukóza oxiduje atmosférickým kyslíkom pôsobením oxidázy glukózy, vytvorí sa ekvimolárne množstvo peroxidu vodíka. Pri pôsobení peroxidázy oxid peroxid vodíka oxiduje chromogénne substráty (zmes fenolu a 4 aminoantipirínu - 4 ° C) s tvorbou farebného produktu. Intenzita farby je úmerná obsahu glukózy.

Glukóza + O2 + H20 glukonolaktón + H202

2H202 + fenol + 4AAP sfarbená zlúčenina + 4H20

Postup prác1 ml pracovného roztoku a 0,5 ml fosfátového pufra sa zavedie do dvoch skúmaviek. Do prvej skúmavky sa pridá 0,02 ml moču a do druhej sa pridá 0,02 ml kalibrátora (kalibrácia, štandardný roztok glukózy, 10 mmol / 1). Vzorky sa zmiešajú, inkubujú sa 15 minút pri teplote 37 ° C v termostate a meria sa optická hustota experimentálnych (Dop) a kalibračných (Dk) vzoriek proti pracovnému činidlu pri vlnovej dĺžke 500-546 nm.

Výpočet: C = Dop / Dk  10 mmol / l Dop = Dk =

Obsah glukózy v dennom moči je určený mmol / deň vynásobením výsledku získaného objemom moču zozbieraného za deň.

Poznámka. Ak je obsah cukru v moči vyšší ako 1%, musí sa zriediť.

V súčasnosti biochemické laboratóriá používajú jednotnú expresnú metódu na analýzu moču na glukózu pomocou reaktívneho glukózového testu glukózy alebo pomocou kombinovaných testovacích prúžkov na PH, proteín, glukózu, telá ketónov a krv. Testovacie prúžky, ponorené do nádoby s močom na 1 sek. a porovnajte farbu na stupnici.

Stanovenie bielkoviny pomocou pyrogallolového červeného indikátora

Princíp metódy je založený na fotometrickom meraní optickej hustoty roztoku farebného komplexu vytvoreného interakciou proteínových molekúl s molekulami komplexu pyrogallol-červeného farbiva a molybdénanu sodného (komplex Pyrogallol Red-Molybdate) v kyslom médiu. Intenzita farby roztoku je úmerná obsahu proteínu v skúmanom materiáli. Prítomnosť detergentov v činidle poskytuje ekvivalentnú definíciu proteínov rôznej povahy a štruktúry.

Činidiel. 1) 1,5 mmol / l roztoku pyrogallolu červenej (PGK): 60 mg PGK rozpusteného v 100 ml metanolu. Skladujte pri teplote 0–5 ° C; 2) 50 mmol / 1 roztok jantárového pufra pH 2,5: 5,9 g kyseliny jantárovej (HOOC-CH2-CH2-COOH); 0,14 g oxalátu sodného (Na2C204) a 0,5 g benzoátu sodného (C6H5COONa) sa rozpustí v 900 ml destilovanej vody; 3) roztok 10 mol / l roztoku kryštalického hydrátu molybdénanu sodného (Na2MoO4 × 2H20): 240 mg molybdénanu sodného sa rozpustí v 100 ml destilovanej vody; 4) Pracovné činidlo: do 900 ml tlmivého roztoku sukcinátu sa pridá 40 ml roztoku PHC a 4 ml roztoku molybdénanu sodného. PH roztoku sa upraví na 2,5 pomocou 0,1 mol / l roztoku kyseliny chlorovodíkovej (HCl) a jeho objem sa upraví na 1 1. Činidlo v tejto forme je pripravené na použitie a je stabilné, keď sa skladuje na tmavom mieste a pri teplote 2 - 25 ° C počas 6 mesiacov; 5) 0,5 g / l štandardného roztoku albumínu.

Priebeh odhodlania. Do prvej skúmavky sa zavedie 0,05 ml študovaného moču, do druhej testovacej skúmavky sa pridá 0,05 ml štandardného roztoku albumínu a do tretej skúmavky (kontrolná vzorka) sa pridá 0,05 ml destilovanej vody a potom sa do týchto skúmaviek pridajú 3 ml pracovného činidla. Obsah skúmaviek sa zmieša a po 10 minútach sa vzorka a štandard fotometricky odmeria proti kontrolnej vzorke pri vlnovej dĺžke 596 nm v kyvete s dĺžkou optickej dráhy 10 mm.

Výpočet koncentrácie proteínu v analyzovanej vzorke moču sa vykonáva podľa vzorca: t

C = 0,5 × Apr / Ast,

kde C je koncentrácia proteínu v analyzovanej vzorke moču, g / l; Apr a Ast - extinkcia skúmanej vzorky moču a štandardného roztoku albumínu, g / l; 0,5 - koncentrácia štandardného roztoku albumínu, g / l.

  • farba roztoku (farebný komplex) je stabilná počas jednej hodiny;
  • priamo úmerný vzťah medzi koncentráciou proteínu vo vzorke a absorpciou roztoku závisí od typu fotometra;
  • keď je obsah proteínu v moči vyšší ako 3 g / l, vzorka sa zriedi izotonickým roztokom chloridu sodného (9 g / l) a stanovenie sa opakuje. Pri stanovovaní koncentrácie proteínu sa berie do úvahy stupeň zriedenia.
  • Stanovenie močového proteínu
  • Zjednotený test kyseliny sulfosalicylovej
  • Unified Brandberg - Roberts - Stolnikovova metóda
  • Stanovenie množstva proteínu v moči reakciou s kyselinou sulfosalicylovou
  • Metóda Biuret
  • Detekcia v moči proteínu Bens - Jones

Proteinúria - fenomén, pri ktorom sa v moči zistí proteín, čo indikuje možnosť poškodenia obličiek, je faktorom vo vývoji srdcových ochorení, krvných ciev, lymfatických ciev.

Detekcia proteínu v moči neznamená vždy ochorenie. Podobný jav je typický aj pre úplne zdravých ľudí, u ktorých je možné zistiť bielkoviny moču. Hypotermia, fyzická námaha, spotreba bielkovinových potravín vedie k vzniku bielkovín v moči, ktoré zmiznú bez akejkoľvek liečby.

Počas skríningu, 17% prakticky zdravých ľudí určuje proteín, ale len 2% z tohto počtu ľudí vykazujú pozitívny výsledok testu ako znak ochorenia obličiek.

Proteínové molekuly by nemali vstupovať do krvi. Sú životne dôležité pre telo - sú stavebným materiálom pre bunky, podieľajú sa na reakciách ako koenzýmy, hormóny, protilátky. U mužov aj žien je miera úplnej neprítomnosti proteínu v moči.

Funkcia prevencie straty proteínových molekúl organizmom sa vykonáva v obličkách.

Na filtrácii moču sa podieľajú dva systémy obličiek:

  1. glomeruly - nenechajte vo veľkých molekulách, ale nezachovajte albumín, globulíny - malú frakciu proteínových molekúl;
  2. renálne tubuly - adsorbujú proteíny filtrované glomeruly, vracajú sa späť do obehového systému.

Albumín (asi 49%), mukoproteíny, globulíny sa nachádzajú v moči, z ktorých podiel imunoglobulínov predstavuje približne 20%.

Globulíny - srvátkové proteíny s vysokou molekulovou hmotnosťou, ktoré sa vytvárajú v imunitnom systéme av pečeni. Väčšina z nich je syntetizovaná imunitným systémom, označuje imunoglobulíny alebo protilátky.

Albumíny sú frakciou proteínov, ktoré sa prvýkrát objavujú v moči aj pri menšom poškodení obličiek. V zdravom moči je nejaký albumín, ale je nevýznamné, že ho nemožno zistiť laboratórnou diagnózou.

Nižšia prahová hodnota, ktorú možno zistiť pomocou laboratórnej diagnostiky, je 0,033 g / l. Ak sa stratí viac ako 150 mg proteínu denne, hovorí sa o proteinúrii.

Základné údaje o proteíne pre moč

Choroba s miernou proteinúriou je asymptomatická. Vizuálne, moč bez bielkovín nemožno odlíšiť od moču, v ktorom je malé množstvo proteínu. Niekoľko penového moču sa už stáva s vysokým stupňom proteinúrie.

Aktívne vylučovanie proteínu v moči je možné predpokladať len u pacientov so stredne ťažkým alebo ťažkým stupňom ochorenia v dôsledku výskytu edému končatín, tváre, brucha.

V počiatočných štádiách ochorenia môžu byť nepriame príznaky proteinúrie nasledovné:

  • zmena farby moču;
  • rastúca slabosť;
  • nedostatok chuti do jedla;
  • nevoľnosť, zvracanie;
  • bolesť kostí;
  • ospalosť, závraty;
  • zvýšená teplota.

Vzhľad takýchto príznakov nemožno ignorovať, najmä počas tehotenstva. To môže znamenať miernu odchýlku od normy a môže byť príznakom vzniku preeklampsie, preeklampsie.

Kvantitatívne hodnotenie straty proteínov nie je ľahká úloha, aby sa dosiahol kompletnejší obraz o stave pacienta, používa sa niekoľko laboratórnych testov.

Ťažkosti pri výbere metódy na detekciu nadbytočného proteínu v moči sú vysvetlené:

  • nízka koncentrácia bielkovín, ktorá vyžaduje vysoko presné prístroje na rozpoznávanie;
  • zloženie moču, komplikuje úlohu, pretože obsahuje látky, ktoré skresľujú výsledok.

Najväčšie informácie poskytuje analýza prvého ranného moču, ktorý sa zozbiera po prebudení.

V predvečer analýzy musia byť splnené tieto podmienky:

  • Nejedzte korenené, vyprážané, bielkovinové potraviny, alkohol;
  • vylúčiť diuretikum počas 48 hodín;
  • obmedziť fyzickú aktivitu;
  • starostlivo dodržiavať pravidlá osobnej hygieny.

Ranný moč je najviac informatívny, pretože je dlhodobo v močovom mechúre, menej závislý od príjmu potravy.

Je možné analyzovať množstvo bielkovín v moči náhodnou časťou, ktorá sa berie kedykoľvek, ale táto analýza je menej informatívna, čím vyššia je pravdepodobnosť chyby.

Na kvantifikáciu dennej straty proteínu sa vykoná celková denná analýza moču. K tomu, do 24 hodín zozbierané v špeciálnej plastovej nádobe všetky moč pridelené na deň. Môžete začať zbierať kedykoľvek. Hlavná podmienka - presne v deň odberu.

Kvalitatívna definícia proteinúrie je založená na denaturácii proteínu fyzikálnymi alebo chemickými faktormi. Kvalitatívne metódy sa týkajú skríningu, ktorý umožňuje stanoviť prítomnosť proteínu v moči, ale neposkytuje príležitosť na presné posúdenie stupňa proteinúrie.

Použité vzorky:

  • s varom;
  • kyselina sulfosalicylová;
  • kyselina dusičná, činidlo Larionic vo vzorke Hellerovho kruhu.

Vzorka s kyselinou sulfosalicylovou sa uskutočňuje porovnaním kontrolnej vzorky moču so skúsenou vzorkou, do ktorej sa do moču pridá 7 až 8 kvapiek 20% kyseliny sulfosalicylovej. Záver o prítomnosti proteínu sa uskutočňuje podľa intenzity opaleskujúcej zákalu, ktorá sa objavuje v skúmavke počas reakcie.

Bežnejšie sa používa Gellerov test s použitím 50% kyseliny dusičnej. Citlivosť metódy je 0,033 g / l. Pri tejto koncentrácii proteínu v skúmavke so vzorkou moču a činidlom počas 2-3 minút po začiatku pokusu sa objaví biely prúžok nití, ktorého tvorba indikuje prítomnosť proteínu.

Semikvantitatívne metódy zahŕňajú:

  • spôsob stanovenia proteínu v testovacích prúžkoch v moči;
  • Brandberg-Roberts-Stolnikovova metóda.

Metóda stanovenia podľa Brandberg-Roberts-Stolnikovovej metódy je založená na Gellerovej metóde, ale umožňuje presnejšie odhadnúť množstvo proteínu. Pri vykonávaní testu s použitím tejto techniky s niekoľkými riedeniami moču sa v časovom intervale medzi 2 - 3 minútami od začiatku testu objaví vláknitý proteínový kruh.

V praxi sa ako indikátor používa metóda testovacích prúžkov s aplikovaným farbivom brómfenolovou modrou. Nedostatok testovacích prúžkov je selektívna citlivosť na albumín, čo vedie k skresleniu výsledku v prípade zvýšenia koncentrácie globulínov alebo iných proteínov v moči.

Nevýhody spôsobu tiež zahŕňajú relatívne nízku citlivosť testu na proteín. Testovacie prúžky začínajú reagovať na prítomnosť proteínu v moči pri koncentrácii proteínu vyššej ako 0,15 g / l.

Kvantitatívne metódy hodnotenia možno podmienene rozdeliť na: t

Spôsoby sú založené na vlastnostiach proteínov znižovať rozpustnosť pôsobením väzbového činidla s tvorbou slabo rozpustnej zlúčeniny.

Látky, ktoré spôsobujú väzbu proteínov, môžu byť:

  • kyselina sulfosalicylová;
  • kyselina trichlóroctová;
  • benzetóniumchlorid.

Na základe výsledkov testu sa vyvodia závery založené na stupni zoslabenia svetelného toku vo vzorke so suspenziou v porovnaní s kontrolným. Výsledky tejto metódy nie je možné vždy pripísať spoľahlivému, pretože rozdiely v podmienkach: rýchlosť miešania reaktantov, teplota, kyslosť média.

Účinok na hodnotenie užívania liekov deň predtým, pred vykonaním testov s použitím týchto metód, nemožno vykonať:

  • antibiotiká;
  • sulfónamidy;
  • lieky obsahujúce jód.

Metóda sa vzťahuje na dostupné náklady, čo umožňuje jej široké použitie pri skríningu. Presnejšie výsledky sa však dajú získať použitím drahších kolorimetrických techník.

Citlivé metódy, ktoré presne určujú koncentráciu proteínu v moči, zahŕňajú kolorimetrické metódy.

Môžete to urobiť s vysokou presnosťou:

  • biuretová reakcia;
  • technika Lowry;
  • Farbiace techniky, ktoré používajú farbivá, ktoré tvoria komplexy s proteínmi moču, ktoré sa vizuálne líšia od vzorky.

Kolorimetrické metódy na detekciu proteínu v moči

Metóda sa týka spoľahlivého, vysoko citlivého, umožňujúceho stanoviť v moči albumín, globulíny, paraproteíny. Používa sa ako hlavná metóda objasnenia výsledkov kontroverzných testov, ako aj denných proteínov moču u pacientov s nefrologickými oddeleniami nemocníc.

Ešte presnejšie výsledky možno dosiahnuť Lowryho metódou, ktorá je založená na biuretovej reakcii, ako aj Folinovou reakciou, ktorá rozpoznáva tryptofán a tyrozín v molekulách proteínov.

Na elimináciu možných chýb sa vzorka moču purifikuje dialýzou z aminokyselín, kyseliny močovej. Chyby sú možné pri použití salicylátov, tetracyklínov, chlórpromazínu.

Najpresnejší spôsob stanovenia proteínu je založený na jeho vlastnosti viazať sa na farbivá, ktoré sa používajú:

  • Ponceau;
  • Brilantná modrá Coomassie;
  • pyrogalická červená.

Počas dňa sa množstvo bielkovín vylučovaných močom mení. Na objektívnejšie posúdenie úbytku bielkovín v moči zavedieme koncept denného proteínu v moči. Táto hodnota sa meria vg / deň.

Pre rýchle stanovenie dennej bielkoviny v moči sa množstvo bielkovín a kreatinínu stanoví v jedinej časti moču, potom sa pomer proteín / kreatinín vypočíta na základe straty proteínu za deň.

Metóda je založená na skutočnosti, že rýchlosť vylučovania kreatinínu močom je konštantná, nemení sa počas dňa. U zdravého človeka je normálny pomer bielkovín: kreatinínu v moči 0,2.

Táto metóda eliminuje možné chyby, ktoré sa môžu vyskytnúť pri zbere denného moču.

Kvalitatívne testy častejšie ako kvantitatívne testy dávajú falošne pozitívne alebo falošne negatívne výsledky. Chyby sa vyskytujú v súvislosti s medikáciou, stravovacími návykmi, fyzickou aktivitou v predvečer analýzy.

Dekódovanie tohto kvalitatívneho testu je dané vizuálnym posúdením zákalu v skúmavke v porovnaní s výsledkom testu s kontrolou: t

  1. slabá pozitívna reakcia sa stanoví ako +;
  2. pozitívne ++;
  3. prudko pozitívny +++.

Gellerov kruhový test presnejšie hodnotí prítomnosť bielkovín v moči, ale neumožňuje kvantifikáciu proteínu v moči. Rovnako ako test kyseliny sulfosalicylovej, aj Gellerov test poskytuje len hrubú predstavu o obsahu bielkovín v moči.

Metóda umožňuje kvantitatívne, ale príliš časovo náročné vyhodnotenie stupňa proteinúrie, nepresnosti, pretože pri silnom zriedení sa presnosť hodnotenia znižuje.

Na výpočet bielkoviny je potrebné znásobiť stupeň zriedenia moču o 0, 033 g / l:

Tento test nevyžaduje špeciálne podmienky, tento postup sa dá ľahko urobiť doma. Na to musíte testovací prúžok spustiť do moču na 2 minúty.

Výsledky budú vyjadrené počtom plusy na páse, ktorého dekódovanie je obsiahnuté v tabuľke:

  1. Výsledky testov zodpovedajúce hodnotám do 30 mg / 100 ml zodpovedajú fyziologickej proteinúrii.
  2. Hodnoty na testovacích prúžkoch 1+ a 2 ++ indikujú významnú proteinúriu.
  3. Hodnoty 3 +++, 4 ++++ sú označené patologickou proteinúriou spôsobenou ochoreniami obličiek.

Testovacie prúžky môžu len približne určiť zvýšený proteín v moči. Pre presnú diagnózu nie sú použité, a ešte viac, takže nemôžu povedať, čo to znamená.

Nedovoľte, aby testovacie prúžky primerane hodnotili množstvo bielkovín v moči u gravidných žien. Spoľahlivejšou metódou hodnotenia je stanovenie proteínu v dennom moči.

Stanovenie proteínov moču pomocou testovacích prúžkov: t

Denná bielkovina v moči je presnejšia diagnóza hodnotenia funkčného stavu obličiek. Na tento účel musíte denne zbierať všetok moč vylučovaný obličkami.

Obsah bielkovín v moči možno zistiť pomerom proteín: kreatinín, údaje sú uvedené v tabuľke:

Platné hodnoty pre pomer proteín / kreatinín sú údaje v tabuľke:

So stratou viac ako 3,5 g proteínu za deň sa tento stav nazýva masívna proteinúria.

Ak je v moči veľa bielkovín, po 1 mesiaci sa vyžaduje opätovné vyšetrenie, potom po 3 mesiacoch podľa výsledkov, ktoré určujú, prečo je norma prekročená.

Príčiny zvýšeného množstva bielkovín v moči sú jeho zvýšená produkcia v tele a zhoršená funkcia obličiek, rozlišuje sa proteinúria: t

  • fyziologické - menšie odchýlky od normy sú spôsobené fyziologickými procesmi, spontánne vyriešené;
  • patologické zmeny sú dôsledkom patologického procesu v obličkách alebo iných orgánoch organizmu bez postupovania liečby.

Mierny nárast proteínov možno pozorovať s bohatou výživou proteínov, mechanickými popáleninami, poraneniami, sprevádzanými zvýšenou produkciou imunoglobulínov.

Mierna proteinúria môže byť spôsobená fyzickou námahou, psycho-emocionálnym stresom alebo užívaním určitých liekov.

Fyziologická proteinúria je zvýšenie proteínov v moči u detí v prvých dňoch po narodení. Po týždni života sa však obsah bielkovín v moči dieťaťa považuje za odchýlku od normy a naznačuje vyvíjajúcu sa patológiu.

Ochorenie obličiek, infekčné ochorenia sú tiež niekedy sprevádzané výskytom proteínu v moči.

Takéto stavy zvyčajne zodpovedajú miernemu stupňu proteinúrie, sú prechodnými javmi, rýchlo prejdú sami bez toho, aby vyžadovali špeciálnu liečbu.

Závažnejšie stavy, závažná proteinúria je zaznamenaná v prípade:

  • glomerulonefritis;
  • diabetes;
  • ochorenia srdca;
  • rakovina močového mechúra;
  • mnohopočetný myelóm;
  • infekcia, poškodenie liekmi, ochorenie polycystických obličiek;
  • vysoký krvný tlak;
  • systémový lupus erythematosus;
  • Goodpastureov syndróm.

Črevná obštrukcia, zlyhanie srdca a hypertyreóza môžu spôsobiť stopy bielkovín v moči.

Odrody proteinúrie sa klasifikujú niekoľkými spôsobmi. Pre kvalitatívne hodnotenie proteínov je možné použiť Yaroshevského klasifikáciu.

Systematikou Yaroshevsky, vytvorený v roku 1971, rozlišuje proteinúriu:

  1. obličiek - čo zahŕňa porušenie glomerulárnej filtrácie, uvoľňovanie proteínu z tubulov, nedostatok re-adsorpcie proteínov v tubuloch;
  2. - sa vyskytuje mimo obličiek, vylučovanie hemoglobínu, proteínov, ktoré sa vyskytujú v krvi v dôsledku mnohopočetného myelómu;
  3. Postrenal - vyskytuje sa v mieste močového traktu po obličkách, vylučovanie bielkovín v deštrukcii močových orgánov.

Kvantitatívne hodnotenie toho, čo sa deje, sa izoluje podmienečne stupňami proteinúrie. Treba mať na pamäti, že sa bez liečby môžu ľahko dostať do ťažšieho.

Najťažšie štádium proteinúrie sa vyvíja so stratou viac ako 3 g proteínu za deň. Strata proteínu od 30 mg do 300 mg denne zodpovedá strednému štádiu alebo mikroalbumúrii. Až 30 mg proteínu v dennom moči znamená miernu proteinúriu.

Proteínová norma v moči koľko?

    Normálny proteín v moči prakticky chýba (menej ako 0,002 g / l). V niektorých podmienkach sa však malé množstvo proteínu môže objaviť v moči u zdravých jedincov po požití veľkého množstva bielkovinovej potravy v dôsledku chladenia, emocionálneho stresu, predĺženej fyzickej námahy (tzv. Pochodovej proteinúrie).

Výskyt významného množstva proteínu v moči (proteinúria) je patológia. Príčinou proteinúrie môže byť ochorenie obličiek (akútna a chronická glomerulonefritída, pyelonefritída, gravidná nefropatia, atď.) Alebo močové cesty (zápal močového mechúra, prostaty, močovodov). Renálna proteinúria môže byť organická (glomerulárna, tubulárna a prebytok) a funkčná (febrilná proteinúria, ortostatická u adolescentov, pri prekročení dojčiat, u novorodencov). Funkčná proteinúria nie je spojená s renálnou patológiou. Denné množstvo proteínu sa líši u pacientov od 0,1 do 3,0 g alebo viac. Zloženie proteínov v moči sa stanoví elektroforézou. Vzhľad Bens-Jonesovho proteínu v moči je charakteristický pre myelóm a Waldenstromovu makroglobulinémiu, # 223; 2 mikroglobulíny v prípade poškodenia renálnych tubulov.

  • Normálny proteín v moči prakticky chýba (menej ako 0,002 g / l).
  • Hlavné príznaky ochorenia zistené v štúdii moču.

    SG Špecifická hmotnosť. Zníženie špecifickej hmotnosti indikuje zníženie schopnosti obličiek koncentrovať moč a odstraňovať toxíny z tela, čo sa stáva v prípade zlyhania obličiek. Zvýšenie špecifickej hmotnosti je spojené s veľkým množstvom cukru v moči, so soľami. Treba poznamenať, že nie je možné vyhodnotiť mernú hmotnosť len pre jeden test moču, môžu byť náhodné zmeny, je potrebné opakovať analýzu moču 1-2 krát.

    Proteín Proteín v moči - proteinúria. Príčinou proteinúrie môže byť poškodenie samotných obličiek pri nefritíde, amyloidóze a poškodení jedmi. Proteín v moči sa môže objaviť aj v dôsledku ochorení močových ciest (pyelonefritída, cystitída, prostatitída).

    Glukóza Glukóza (cukor) v moči - glykozúria - najčastejšie v dôsledku diabetu. Zriedkavejšou príčinou je porážka renálnych tubulov. Je veľmi znepokojujúce, ak sa spolu s cukrom v moči zistia telieska ketónov. To sa deje s ťažkým, nevyrovnaným diabetes mellitus a je predzvesťou najzávažnejších komplikácií diabetu - diabetickej kómy.

    Bilirubin, Urobilinogén Bilirubín a urobilín sa určujú v moči v rôznych formách žltačky.

    Erytrocyty Erytrocyty v moči - hematuria. To sa deje buď s porážkou samotných obličiek, najčastejšie so zápalom, alebo u pacientov s chorobami močových ciest. Ak sa napríklad po nich pohybuje kameň, môže poškodiť sliznicu, v moči budú červené krvinky. Rozpadajúci sa nádor obličiek môže tiež viesť k hematurii.

    Leukocyty Leukocyty v moči - leukocytúria, najčastejšie výsledkom zápalových zmien v močovom trakte u pacientov s pyelonefritídou, cystitídou. Leukocyty sú často určené zápalom ženských vonkajších pohlavných orgánov, u mužov, zápalom prostaty.

    Cylindrové valce sú zvláštnymi mikroskopickými štruktúrami. Hyalínové fľaše v množstve 1-2 môžu byť u zdravého človeka. Sú tvorené v renálnych tubuloch, sú zlepené spolu s proteínovými časticami. Zvýšenie ich počtu, valce iných typov (granulované, erytrocytové, mastné) však vždy indikujú poškodenie samotného obličkového tkaniva. Tam sú valce v zápalových ochoreniach obličiek, metabolické lézie, ako je diabetes.

    Informatívna metóda a jej limity. Informačný obsah všeobecnej analýzy moču na detekciu špecifických ochorení obličiek je nízky, zvyčajne si vyžaduje ďalšie, presnejšie štúdie. Výskum je však veľmi dôležitý, najmä pri vykonávaní preventívnych štúdií, pretože umožňuje identifikovať skoré príznaky ochorenia obličiek. Je tiež známe, že ochorenie obličiek sa často vyskytuje skryté a iba štúdium moču im umožňuje podozrenie a ďalšie potrebné vyšetrenie.

    Vo väčšine laboratórií, pri skúmaní moču na bielkoviny, najprv použiť kvalitatívne reakcie, ktoré nedetegujú proteín v moči zdravého človeka. Ak sa proteín v moči zistí kvalitatívnymi reakciami, vykoná sa kvantitatívne (alebo semikvantitatívne) stanovenie. Súčasne sú dôležité vlastnosti použitých metód pokrývajúcich rôzne spektrum uroproteínov. Pri určovaní proteínu s použitím 3% kyseliny sulfosalicylovej sa množstvo proteínu považuje za normálne až do 0,03 g / l, zatiaľ čo pri použití metódy pyrogallolu stúpa limit hodnôt normálneho proteínu na 0,1 g / l. V tejto súvislosti je potrebné vo formulári analýzy uviesť normálnu hodnotu proteínu pre metódu použitú v laboratóriu.

    Pri určovaní minimálneho množstva bielkovín sa odporúča zopakovať analýzu, v prípade pochybností by sa mala stanoviť denná strata bielkovín v moči. Bežný denný moč obsahuje bielkoviny v malých množstvách. Za fyziologických podmienok je filtrovaný proteín takmer úplne reabsorbovaný epitelom proximálnych tubulov a jeho obsah v dennom množstve moču sa mení podľa rôznych autorov od stôp po 20 50, 80 100 mg a dokonca 150 až 200 mg. Niektorí autori sa domnievajú, že denné vylučovanie bielkovín v množstve 30 50 mg / deň je pre dospelého jedinca fyziologickou normou. Iní sa domnievajú, že vylučovanie proteínov v moči by nemalo prekročiť 60 mg / m2 povrchu tela denne, okrem prvého mesiaca života, keď hodnota fyziologickej proteinúrie môže byť štyrikrát vyššia ako špecifikované hodnoty.

    Všeobecnou podmienkou vzniku proteínov v moči zdravého človeka je ich pomerne vysoká koncentrácia v krvi a molekulová hmotnosť nie väčšia ako 100 200 kDa.

  • to nie je normou, s vašou diagnózou je to možné, ďalšia vec je, že pre nefrotický syndróm je to vlastne malý indikátor. Pozrite sa na kliniku - edém, tlak, atď., pokračujte v predpísanej liečbe.
  • a predsa budem hovoriť: je to OK NIE!